水国产av电影网站獸藥殘留快速分析
[2010/6/4]
水国产av电影网站獸(shou) 藥殘留快速分析
1 水国产av电影网站藥殘概論
藥物在預防、治療水產(chan) 疾病中起到積極作用,但同時又帶來了藥物殘留(簡稱藥殘)問題。目前,水国产av电影网站藥物殘留問題日益嚴(yan) 重,它不僅(jin) 對人體(ti) 健康造成潛在危害,而且還影響著水国产av电影网站進出口貿易,已成為(wei) 出口貿易的瓶頸,因此加強水国产av电影网站藥物殘留監管,提高水国产av电影网站質量安全已是刻不容緩。
1. 水国产av电影网站藥物殘留的定義(yi)
水国产av电影网站藥物殘留是指對人體(ti) 健康產(chan) 生重大影響的,在水国产av电影网站的任何食用部分中,藥物的原型化合物或者其代謝產(chan) 物,及與(yu) 藥物本體(ti) 有關(guan) 雜質的殘留。主要的殘留藥物有消毒劑、驅殺蟲劑、抗菌藥(抗生素、磺胺類、呋喃類)、激素類、基因誘導劑、疫苗等。
2. 水国产av电影网站藥物殘留對人體(ti) 的危害
對於(yu) 大多數人們(men) 來說,主要是通過食用帶有殘留獸(shou) 藥的水產(chan) 食品,這種接觸幾乎每天都有,是長期的。水国产av电影网站藥物殘留對人體(ti) 的危害主要有以下幾個(ge) 方麵:
(1) 人類細菌耐藥性增加
目前漁用抗菌藥物使用範圍和劑量的日益擴大,抗菌藥藥性殘留於(yu) 水產(chan) 動物食品中,同樣使人長期與(yu) 藥物接觸,導致人體(ti) 現人耐藥菌的增加,耐藥性的增強。現已研究證實細菌的耐藥性可以通過耐藥質粒在人群中細菌、動物群中細菌和生態係統中細菌間相互傳(chuan) 遞,導致致病菌產(chan) 生耐藥性。
(2)毒性損傷(shang)
藥物殘留可通過食物鏈長期富集而對人體(ti) 造成一定程度的損傷(shang) 。如:硝酸亞(ya) 汞、甘汞等製品對魚類小瓜蟲的治療效果好,但其在魚體(ti) 內(nei) 易富集、殘留,當人攝入後可引起腎損傷(shang) ,表現為(wei) 變性和壞死,引起腎功能降低。一些抗生素的長期使用和濫用在水產(chan) 動物国产av电影网站的殘留也會(hui) 造成一些潛在的危害。如:氯黴素可抑製骨髓造血功能,引起再生障礙性貧血和粒細胞缺乏症;呋喃唑酮可引起溶血性貧血、多發性神經炎和急性肝壞死等;四環素類可抑製幼兒(er) 牙發育和骨骼生長;鏈黴素等氨基糖甙類抗生素損傷(shang) 聽神經和腎功能。
(3)過敏反應或變態反應
磺胺類、四環素類、喹諾酮類和某些基糖甙類抗生素等藥物殘留於(yu) 水產(chan) 動物性国产av电影网站中進入人體(ti) 後,就使得敏感個(ge) 體(ti) 致敏,產(chan) 生抗體(ti) 。當這些被致敏的個(ge) 體(ti) 再次接觸這些抗生素時,則這些抗生素會(hui) 與(yu) 抗體(ti) 結合生成抗原抗體(ti) 複合物,激活體(ti) 內(nei) 肥大細胞和嗜堿性粒細胞,釋放組胺、ECF-A、LTS、PG和PAF等物質刺激,集體(ti) 出現平滑肌痙攣、身管擴張、微血管通透性增加、組織水腫、粘膜腺體(ti) 分泌等病理損傷(shang) 。過敏反應或變在臨(lin) 床上輕者可表現為(wei) 有瘙癢的蕁麻疹、惡心嘔吐、腹痛腹瀉,重者表現為(wei) 血壓急劇下降、迅速引起過敏性休克,甚至死亡。如磺胺類藥物可引起人類的皮炎、血細胞減少、溶血性貧血和藥熱等臨(lin) 床症狀。
(4)三致作用
即致癌、致畸、致突變作用。藥物及環境中的化學藥品可引起基因突變或染色體(ti) 畸變而造成對人類的潛在危害。如水產(chan) 常用促生長劑喹乙醇,現已證實有明顯的蓄積毒性、遺傳(chuan) 毒性和誘變性。長時間使用會(hui) 在魚體(ti) 內(nei) 殘留,而對人的健康造成潛在的威脅,因此對於(yu) 喹乙醇用於(yu) 水產(chan) 的安全性需進一步評價(jia) 。水產(chan) 上常用的治療水黴病的藥物孔雀石綠,是一種強致癌物。據報道魚體(ti) 短期一次接觸孔雀石綠1/15000濃度,就可致細胞突變,現在許多國家和組織已禁止使用。硝基呋喃類藥物(如呋喃唑酮、呋喃西林)近來的研究認為(wei) 長期使用除了會(hui) 對肝、腎造成損傷(shang) 外,同時具有致癌作用和致畸、致突變效應。做為(wei) 水產(chan) 上常用的消毒藥二氯異氰尿酸鈉和三氯異氰尿酸過去認為(wei) 是安全、高效的消毒藥,但近來研究證實其在水體(ti) 中的分解產(chan) 物氰尿酸降解速度非常緩慢,且對人體(ti) 有致癌作用。此外在水產(chan) 上常用的殺蟲藥敵百蟲、促生長劑乙烯雌酚、砷製劑等都已證明具有致癌作用。許多國家都已禁止這些藥用於(yu) 水產(chan) 養(yang) 殖。當人們(men) 長期食用含有三致作用藥物殘留的動物性食品時,這些殘留物便會(hui) 對人體(ti) 產(chan) 生危害,或在人體(ti) 內(nei) 蓄積,最終產(chan) 生致癌、致畸、致突變作用。近年來人群中腫瘤發生率不斷升高,人們(men) 懷疑與(yu) 環境汙染及動物性食品中藥物殘留有一定關(guan) 係。
3. 水国产av电影网站藥物殘留控製的意義(yi)
由於(yu) 水產(chan) 養(yang) 殖藥物殘留具有三致作用、毒性損傷(shang) 、激素樣作用等危害,嚴(yan) 重威脅人體(ti) 健康,已成為(wei) 人類的隱形殺手。近幾年我國出口的水国产av电影网站因藥物殘留問題屢遭禁運,首先是2001年9月,歐盟因氯黴素殘留問題將我國出口到歐盟的凍蝦国产av电影网站納入快速預警機製; 2002年3月,日本厚生省對我國出口到日本的動物源性国产av电影网站實行嚴(yan) 檢,並向我方通報從(cong) 福建進口的鰻魚国产av电影网站中檢出大量氯黴素殘留,同時公布了11種藥物的最大殘留限量。2006年上海市質量監督局從(cong) 山東(dong) 產(chan) 的大鯪鮃中檢測出硝基呋喃類代謝物超標,全國一片嘩然。由此可見,我國從(cong) 保障人民群眾(zhong) 健康,水產(chan) 養(yang) 殖業(ye) 要持續健康發展,水国产av电影网站要進入國際市場的需要,必須嚴(yan) 格控製藥物殘留。
4. 水產(chan) 養(yang) 殖中藥物殘留的控製措施
⑴根據藥物在水產(chan) 動物體(ti) 內(nei) 的藥代動力學規律合理用藥。
⑵開展多種形式的教育工作,提高全民關(guan) 於(yu) 水產(chan) 動物食品安全性的整體(ti) 認識,引導水產(chan) 養(yang) 殖者科學用藥,推廣健康養(yang) 殖技術。
⑶加強和完善我國漁藥殘留的監控體(ti) 係。
a.建立和完善水国产av电影网站的安全保障體(ti) 係,依法開展水国产av电影网站無公害臨(lin) 界控製的檢驗檢疫工作。
b.加強藥物殘留的方法和標準建設,在標準製定中要突出水国产av电影网站安全衛生標準、質量標準、漁藥使用規範、藥物殘留限量及相應的檢測技術和檢測方法的製定。
c.加快縣市一級藥物殘留檢測機構的建立和建設,使之形成從(cong) 完善的藥物殘留檢測網絡機構,便於(yu) 開展水国产av电影网站中藥物殘留的常規檢測,加強藥物殘留的監控力度。
2 水国产av电影网站藥殘分析原理
1.水国产av电影网站藥殘快速檢測的構成要素
相應的檢測儀(yi) 器(酶標儀(yi) 或專(zhuan) 業(ye) 分析儀(yi) TR-300)、樣品前處理工具和檢測試劑盒。
2.檢測原理
采用免疫競爭(zheng) 法定量。微量反應板上包被有羊抗兔抗體(ti) ,檢測時加入特異性的待檢藥殘抗體(ti) 、待檢藥殘標準品或待測樣品溶液及辣根過氧化物酶標記的藥殘結合物溶液,室溫(25℃)下反應,待測藥殘標準品或樣品溶液及過氧化物酶偶聯待測藥殘結合物競爭(zheng) 性地與(yu) 待測藥殘抗體(ti) 結合,形成抗原抗體(ti) 複合物。洗滌後加酶反應底物和顯色劑,結合的酶標記物將無色的顯色劑轉化為(wei) 藍色的產(chan) 物。加入反應終止液後使顏色由藍色變為(wei) 黃色,在450nm處測量吸光度值,樣品中的待測藥殘濃度與(yu) 吸光度值成反比。
3 我國的分析標準
我國現行獸(shou) 藥殘留分析的標準分兩(liang) 類,一類是國家標準,一類為(wei) 農(nong) 業(ye) 部的檢測方法,快速分析大多為(wei) 農(nong) 業(ye) 部的檢測方法。
4 應用及測試步驟
1.應用
水国产av电影网站藥殘快速分析主要有兩(liang) 個(ge) 方麵的應用,第一是為(wei) 了適應大量水国产av电影网站的常規檢測,對於(yu) 各級水国产av电影网站質量安全檢測機構需要快速檢測法,即使用快速檢測法對大量樣本進行初步篩選,再對初篩中具有超出農(nong) 業(ye) 部限量的結果的樣本進行實驗室驗證,如應用HPLC、GC、MS、HPLC-MS等進行進一步測定。第二是為(wei) 了適應隨時隨地的快速檢測,對於(yu) 縣市一級的水国产av电影网站檢測機構,漁業(ye) 合作社、水產(chan) 公司、水產(chan) 批發市的質量監管部門需要快速檢測法,即在短時間內(nei) 對樣本作出判斷,將具有超出農(nong) 業(ye) 部限量結果的国产av电影网站阻止在流通環節之外。
1 海洋與(yu) 漁業(ye) 廳/市縣局的水国产av电影网站質量檢測中心、水產(chan) 種苗監督管理站
2 衛生廳/衛生監督所
3 人民政府食品辦公室
4 內(nei) 地水利水產(chan) 局/水產(chan) 股/漁政
5 国产av电影网站質量監督檢驗所
6 出入境檢驗檢疫部門
7 食品質量監督檢測機構
8 工商局流動檢測車
9 水產(chan) 批發市場
10 農(nong) 貿市場
11 大型廠礦
12 企事業(ye) 單位
13 飯店,賓館,超市
……
2. 我公司關(guan) 於(yu) 水国产av电影网站藥殘快速測試步驟
(1)樣品前處理(以氯酶素藥殘為(wei) 例)
水国产av电影网站(肉類)藥殘富集、提取器操作
------前處理氯酶素藥殘
一、 器具準備
1. 水国产av电影网站(肉類)藥殘富集、提取器;
2. 離心機:4000rpm,6孔20ml角轉子;
3. 20-200 ,100-1000μl數字可調移液槍各一支;
4. 手掌天平:100/0.01 g;
5. 組織均質器:2000-11000轉/分;
6. 組織攪拌器:500轉/分;
7. 10 ml具蓋塑料離心管若幹、20ml塑料離心管12個(ge) ,50 ml若幹塑料離心管4個(ge) ;
8. 手術剪刀一個(ge)
9. 試劑:
乙酸乙酯(分析純),100ml貯瓶;正已烷(分析純),100 ml貯瓶;已稀釋的組織樣品萃取劑,50 ml貯瓶。
二、組織樣品製備
稱取100g去除皮、筋膜的魚脊背肉組織,用手術剪刀按2х2cm剪成塊,放入組織均質器中,每5秒一次,直至打成肉泥。
三、組織樣品藥殘提取、富集
1.稱取1g均質好的組織樣品於(yu) 10 ml具蓋塑料離心管中,離心管置於(yu) 提取架上,用移液槍吸取6000μl乙酸乙酯於(yu) 離心管內(nei) ,離心管上蓋。
2.在藥殘富集、提取儀(yi) 上,設定倒置計時時間為(wei) 5分鍾,倒入38℃左右熱水於(yu) 水浴器內(nei) 1/2,超聲發生係統開啟,放入離心管,倒置計時時間為(wei) 0時取出離心管。
3.離心管放入離心機中,2500 rpm離心8分鍾。
4.用移液槍吸取4000μl上清液於(yu) 另一離心管中,置於(yu) 藥殘富集、提取儀(yi) 吹淋係統架上,吹淋管放入離心管中(注意不能接觸離心管內(nei) 液麵),打開氣源發生器減壓開關(guan) ,調節吹淋係統壓力為(wei) 0.0015kg,50℃恒溫吹幹,過程約3分鍾。
5.移液槍吸取1000μl正已烷(分析純),溶解吹幹後的離心管剩餘(yu) 物,超聲2分鍾,再吸取500μl已稀釋的組織樣品萃取劑加入離心管內(nei) ,繼續超聲1分鍾。
6.超聲完畢的離心管放入離心機中,離心管上蓋,2500 rpm離心8分鍾,下層液相用於(yu) 檢測。
樣品前處理完畢。
(2)樣品檢測
藥殘快速分析儀(yi) 操作------氯酶素藥殘
一、檢測儀(yi) 器操作
開啟藥殘快速分析儀(yi) ,進入“藥殘快速分析”界麵。
第一步 編程
點擊“編程”, 進入編程界麵,進行項目設定,點擊“下級”進入編程
1. 項目名稱和檢測編號設定,
2. 下一級“波長”單、雙波長選擇,
3. 下一級“樣品”單、雙樣和標準雙樣設定,
4. 下一級“檢測方式”設定(吸光度值,定量檢測),
5. 下一級“報告方式”設定(濃度值、正常值、稀釋倍數),
6. 下一級“孔位設置”(空白、質控、標準孔)。
7. 下一級 “參數輸入”(梯度標準值、單位、正常值/限量判定)
8. 編程結束,貯存。
第二步 點擊“檢測”進入檢測界麵
找到要檢測的項目和編號,進入該項目
進行檢測。
板孔設定如下(檢測雙樣)
S=標準樣品 T=測試樣品
S1 |
S1-1 |
T1 |
T1-1 |
T9 |
T9-9 |
T17 |
T17-17 |
T25 |
T25-25 |
T33 |
T33-33 |
S2 |
S2-2 |
T2 |
T2-2 |
T10 |
T10-10 |
T18 |
T18-18 |
T26 |
T26-26 |
T34 |
T34-34 |
S3 |
S3-3 |
T3 |
T3-3 |
T11 |
T11-11 |
T19 |
T19-19 |
T27 |
T27-27 |
T35 |
T35-35 |
S4 |
S4-4 |
T4 |
T4-4 |
T12 |
T12-12 |
T20 |
T20-20 |
T28 |
T28-28 |
T36 |
T36-36 |
S5 |
S5-5 |
T5 |
T5-5 |
T13 |
T13-13 |
T21 |
T21-21 |
T29 |
T29-29 |
T37 |
T37-37 |
S6 |
S6-6 |
T6 |
T6-6 |
T14 |
T14-14 |
T22 |
T22-22 |
T30 |
T30-30 |
T38 |
T38-38 |
|
|
T7 |
T7-7 |
T15 |
T15-15 |
T23 |
T23-23 |
T31 |
T31-31 |
T39 |
T39-39 |
|
|
T8 |
T8-8 |
T16 |
T16-16 |
T24 |
T24-24 |
T32 |
T32-32 |
T40 |
T40-40 |
標板設定按圖4,根據檢測量,可全選或部分選,標板設定完畢後,待檢測操作完成後,點擊“開始”進行檢測。
二、加樣記錄準備
待所有試劑的溫度回複至室溫(約19℃至25℃)方可使用。為(wei) 了減低邊緣效應,建議在反應過程中用標板密封膠片將標板密封。每個(ge) 標準或樣品要做兩(liang) 份平行試驗,並做好加樣位置的記錄。
三、檢測操作
1.用移液槍吸取標準或樣品25ul,分別加入到指定的微孔中,然後加入100ul酶標記物到每一個(ge) 微孔中,用密封膠紙把反應板蓋住。
2.左右輕敲反應板邊緣數秒,將其置於(yu) 室溫下(19℃~25℃)培養(yang) 1小時。翻轉反應板,使孔內(nei) 所有液體(ti) 傾(qing) 出。
3.吸取已稀釋的洗滌緩衝(chong) 劑250—300ul洗滌反應板4次,每次洗滌時,將所有液體(ti) 輕輕倒出、拍幹。
4.立刻用移液槍移取125μl單組分底物/發色劑到每一孔裏。完畢後,左右輕敲反應板,將其放在避光處(約20℃至25℃)20±2分鍾。
5.加入100μl0.2M硫酸終止反應,反應物的顏色會(hui) 由藍色轉為(wei) 黃色。
6.在10分鍾內(nei) ,上藥殘分析儀(yi) ,測定,打印結果。
5 國內水国产av电影网站藥殘快速檢測市場分析
1.檢測形式分析
目前國內(nei) 水国产av电影网站藥殘分兩(liang) 種檢測形式,第一種為(wei) “兩(liang) 步法”,即酶標儀(yi) 法,利用醫療檢測設備酶標儀(yi) 對水国产av电影网站藥殘進行(OD值)的比色,測出OD值後,或利用電子計算器進行半對數計算,或利用試劑廠家提供的計算小軟件進行數據整理,再求反對數結果;第二種為(wei) “一步法”,即專(zhuan) 用藥殘分析儀(yi) 法,利用專(zhuan) 用藥殘分析儀(yi) ,檢測結果直接求出,並配有標準曲線圖形,相關(guan) 係數,回歸線性方程的斜率和截距,檢測一目了然。(對於(yu) 政府部門對於(yu) 水国产av电影网站藥殘的市場管理,可設定出農(nong) 業(ye) 部的限量標準,檢測結果直接顯示和判定是否超標)
雖然有的酶標儀(yi) 廠家也給出了定量計算公式,但由於(yu) 檢測試劑不同,稀釋倍數不同,也沒辦法直接得出結果。
2.前處理工具分析
以往水国产av电影网站藥殘快速檢測項目,政府或用戶招標采購後,酶標儀(yi) 隻做為(wei) 終端機使用,最多配幾隻移液器,往往忽略前處理工具的采購,二次采購需要增加德國進口均漿機,氮吹儀(yi) ,震蕩器,培養(yang) 箱等設備,增加很大成本,且儀(yi) 器設備多而笨重,實現不了便攜現場檢測。
GZTRAD水国产av电影网站藥殘快速檢測儀(yi) 的前處理采用超聲萃取技術,所用設備為(wei) 模塊化的藥殘快速富集提取器,前處理設備和檢測儀(yi) 器集中在兩(liang) 個(ge) 工具箱內(nei) ,可實現便攜現場檢測。
6 GZTRAD水国产av电影网站(肉類)藥殘快速檢測儀特點
1. 見宣傳(chuan) 材料。
2. 定標曲線帶曲線修正功能,很大程度上避免了檢測試劑對檢測結果的影響。
3. 標準曲線的存貯,節省昂貴的檢測試劑。同一檢測試劑,最少可進行一個(ge) 樣品的檢測,最多可進行84個(ge) 樣品檢測,而不用再做定標曲線。
7 藥殘快速分析儀儀器維護及質量保證
1.儀(yi) 器維護
1.1概述
本儀(yi) 器在正常使用過程中,隻需正常的清潔維護即可,但以下部件經長時間工作後,可能會(hui) 出現失效或故障,請到指定維修點維修或請用戶在專(zhuan) 業(ye) 人員指導下進行維修。為(wei) 了使儀(yi) 器保持一個(ge) 良好的狀態,必須做好日常維護工作。
警告:儀(yi) 器的維修需要專(zhuan) 業(ye) 人員操作,在維修或其他原因拆卸外殼時必須切斷電源,並且閉主機。
1.2 清潔儀(yi) 器
1)保持儀(yi) 器工作環境的清潔。
2)儀(yi) 器表麵的清潔,可以用中性清潔和濕布擦試。
3)液晶顯示器請用柔軟的布清潔。
警告:請勿讓任何溶劑、油脂類、腐蝕性物質接觸儀(yi) 器。
1.3 儀(yi) 器部件更換
1.3.1 更換保險絲(si)
1) 關(guan) 閉電源開關(guan) 。
2)保險絲(si) 安裝在儀(yi) 器後麵電源開關(guan) 旁邊的保險絲(si) 盒中,擰開保險盒十字螺釘,更換同種規格的保險絲(si) 。保險絲(si) 規格:φ5×20 250V、2A。
1.3.2 更換濾光片
濾光片經過一段使用後,基透射率會(hui) 有所下降。當下降到儀(yi) 器不能正常工作時,儀(yi) 器會(hui) 自動給出顯示,提醒用戶及時更換。更換方法如下:打開儀(yi) 器上蓋,找到濾光盤,查到失效的濾光片,取出已失效的舊片,換上新片即可。
1.3.3 更換光源燈
當光源燈損壞時,儀(yi) 器也會(hui) 自動給出顯示,這時可打開儀(yi) 器上蓋,經檢查確定是燈泡損壞時,拔下燈插座,用手輕輕由下向上取出燈泡,更換上新的同規格燈即可。如果更換新燈泡後,儀(yi) 器仍指示有故障,請及時通知本公司專(zhuan) 業(ye) 人員前去調試。
1.4 簡單故障處理
現 象 |
原 因 |
解 決(jue) 方 案 |
儀(yi) 器不能啟動 |
電源不正常 |
檢查是否通電,電源插頭不否鬆脫,保險絲(si) 是否斷路,電源電壓是否合格。 |
托盤運動不正常 |
步進電機引線插接不良;同步帶鬆脫;運動部件移位卡住支,定位光耦鬆脫或損壞 |
校正傳(chuan) 動機構,請專(zhuan) 業(ye) 人員調整。重新檢查各聯接線,擰緊鬆動光耦。 |
自檢不正常 |
光係統故障;波長設置不對 |
查看光源燈是否亮,重新設置一次係統的波長值。 |
檢測結果不正確 |
光源燈和濾光片老化 |
及時更換新的光源燈和濾光片 |
打印機燈常閃 |
打印機接收故障,傳(chuan) 送數據出錯 |
關(guan) 掉打印機電源,等一會(hui) 再打開;更換打印控製板 |
2. 質量承諾
從(cong) 發貨之日起一年內(nei) ,本儀(yi) 器若因質量問題不能正常工作,本公司將無償(chang) 為(wei) 用戶修理或更換元器件或更換該国产av电影网站。對於(yu) 違反規定或者用戶自拆卸導致儀(yi) 器損壞,則須收取維修工本費,一年以後,本公司負責該儀(yi) 器的終身維護。